乙型肝炎血清标志物检验中化学发光免疫检验的应用价值分析

俞春景
永康市第一人民医院  浙江永康  321300

【摘要】目的 探讨化学发光免疫检验在乙型肝炎血清标志物检验中的应用价值。方法 选取2023年1月至2025年12月期间在本院进行乙型肝炎血清标志物检验的40例患者作为研究对象，均开展酶联免疫吸附试验和化学发光免疫检验，依据检验方法的不同将其设为对照组（n=40，酶联免疫吸附试验）与研究组（n=40，化学发光免疫检验），以乙型肝炎病毒基因（HBV DNA）为金标准，对比分析两组检验结果在诊断效能以及检测时间方面的差异。结果 研究组检验中的灵敏度、特异度、准确度均高于对照组（P＜0.05）；研究组平均检测时间短于对照组（P＜0.05）。结论 化学发光免疫检验在乙型肝炎血清标志物检验中具有较高的灵敏度、特异度和准确度，且检测时间短，具有显著的临床应用价值。

【关键词】乙型肝炎；血清标志物；化学发光免疫检验；酶联免疫吸附试验

乙型肝炎由病毒引发，严重威胁人类健康，而乙型肝炎血清标志物检验是诊断、评估病情及监测疗效的重要手段^[1]。目前常用检验方法有酶联免疫吸附试验，其操作简便、成本低但有局限；化学发光免疫检验，其灵敏度高、特异度强等，应用渐广^[2-3]。鉴于此本研究为验证化学发光免疫检验在乙型肝炎血清标志物检验中的临床优越性，选取2023年1月至2025年12月本院40例患者展开研究，报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2023年1月至2025年12月期间在本院进行乙型肝炎血清标志物检验的40例患者作为研究对象。其中，男性患者24例，女性患者16例；年龄范围为20-65岁，平均年龄为（42.35±10.21）岁；病程范围为1-10年，平均病程为（4.56±2.31）年。本研究符合伦理道德要求。纳入标准：①临床资料完整且存在肝区不适等相关症状；②年龄在18-65岁之间；③患者或其家属愿意配合完成本研究相关检验及评估。排除标准：①合并其他类型肝炎或肝脏疾病；②存在严重的精神障碍；③存在过敏史。

1.2方法

对照组：采用酶联免疫吸附试验：（1）采集患者空腹静脉血5ml，置于干燥试管中，室温下静置30分钟后，以3000r/min的转速离心10分钟，分离血清，置于-20℃冰箱保存备用。（2）将血清样本加入已包被抗体的微孔板中，37℃孵育60分钟。（3）洗涤微孔板，去除未结合的物质，加入酶标记抗体，37℃孵育30分钟。（4）再次洗涤微孔板，加入底物溶液，室温下避光反应30分钟。（5）加入终止液终止反应，用MY08酶联一体机在450nm波长处测定吸光度值。（6）根据标准曲线计算各血清标志物的含量。

研究组：采用化学发光免疫检验：（1）同样采集患者空腹静脉血5ml，处理及保存方法同对照组。（2）使用全自动化学发光分析仪（厦门优迈科医学仪器有限公司，型号Wan200+）及配套试剂进行检验。将血清样本加入反应杯中，加入磁微粒标记的抗体和化学发光底物，激发化学发光反应。（3）用光电倍增管检测化学发光信号强度，仪器自动根据标准曲线计算各血清标志物的含量。

1.3观察指标

以乙型肝炎病毒基因（HBV DNA）为金标准，通过聚合酶链反应（PCR）检验，其中阳性为HBV DNA定量检查值＞30IU/ml，阴性为HBV DNA定量检查值≤30IU/ml。对照组标准：阴性是未检测出乙型肝炎表面抗原（Hepatitis B Surface Antigen，HBsAg）、乙型肝炎e抗原（Hepatitis B e Antigen，HBeAg）；阳性则是检测出上述抗原。研究组标准：阴性同样是未检测出HBsAg、HBeAg；阳性则是检测出上述抗原。

通过金标准分析两组的灵敏度[真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%]、特异度[真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%]、准确度[（真阳性例数+真阴性例数）/总例数×100%]。同时记录从采集血液样本到得出检验结果的总时间。

1.4统计学方法

本文所涉及的数据运用SPSS 23.0统计软件进行分析处理。对于计量资料，若其符合正态分布特征，则采用（±s）的形式来表述，不同组别间的对比运用独立样本t检验法；计数资料采用[n（%）]的形式呈现，运用χ²检验开展分析。当P＜0.05时差异具有统计学意义。

2结果

2.1诊断效能比较

金标准诊断结果显示，乙肝阳性25例，乙肝阴性15例。研究组检验中的灵敏度、特异度、准确度均高于对照组（P＜0.05），具体数据见表1。

表1诊断效能情况比较（例）

检查方案	结果	HBV-DNA诊断（金标准）
		阳性	阴性
对照组	阳性	18	6
	阴性	6	10
研究组	阳性	24	1
	阴性	1	14

续表1诊断效能情况比较（例）

检查方案	灵敏度	特异度	准确度
对照组	18/24=0.75	10/16=0.63	28/40=0.70
研究组	24/25=0.96	14/15=0.93	38/40=0.95
	4.410	4.210	8.658
P	0.036	0.040	0.003

2.2检测时间比较

研究组平均检测时间为（45.23±5.66）分钟，对照组平均检测时间为（120.16±10.52）分钟。经独立样本t检验分析，t=39.670，P＜0.001，差异具有统计学意义，表明研究组检测时间短于对照组。

3讨论

3.1化学发光免疫检验的优势分析

本研究结果显示，化学发光免疫检验在检验中的灵敏度、特异度和准确度均显著高于酶联免疫吸附试验，且检测时间更短。这是因为化学发光免疫检验结合了化学发光分析的高灵敏度和免疫反应的高特异性，通过磁微粒标记抗体和化学发光底物，能够更精准地检测血清中极微量的乙型肝炎标志物^[4]。在灵敏度方面，化学发光免疫检验的灵敏度均达到90%以上，远高于对照组数据，这意味着化学发光免疫检验能够更早地发现乙型肝炎病毒感染，对于疾病的早期诊断和及时治疗具有重要意义。特异度方面，化学发光免疫检验也表现优秀，其高特异度可以有效减少假阳性结果的出现，避免给患者带来不必要的心理负担和进一步检查的经济负担^[5]。除此之外，准确度是综合评价检验方法优劣的重要指标，化学发光免疫检验的准确度均明显高于对照组数据。这得益于其高灵敏度和高特异度的共同作用，使得检验结果更接近真实情况，为临床诊断和治疗提供更准确的参考^[6]。在检测时间上，化学发光免疫检验具有明显优势，因为其采用自动化仪器进行检测，操作简便快捷，从样本处理到得出结果的总时间显著短于对照组数据。这对于临床工作中需要快速获取检验结果的情况，如急诊患者的诊断和治疗，具有重要的实际应用价值^[7]。

3.2两种检验方法差异的原因探讨

酶联免疫吸附试验虽然操作相对简便、成本较低，但在灵敏度和特异度方面存在一定局限性。其主要原因是依赖于酶催化底物显色反应来检测抗原抗体结合情况，显色反应的灵敏度有限，且容易受到多种因素的干扰，如样本中杂质、反应条件等，从而影响检测结果的准确性^[8-9]。此外，酶联免疫吸附试验的操作步骤相对较多，每个步骤都需要严格控制条件，否则容易导致误差的积累，进一步降低检测的灵敏度和特异度^[10]。相对而言，化学发光免疫检验则采用先进的化学发光技术和磁微粒分离技术，具有极高的灵敏度，能够检测到极微弱的光信号，从而大大提高对血清标志物的检测能力。同时化学发光免疫分析仪的自动化程度高，也能够减少人为操作误差，保证检测结果的稳定性和准确性。

3.3结论

综上所述，化学发光免疫检验在乙型肝炎血清标志物检验中具有较高的灵敏度、特异度和准确度，且检测时间短，能够为临床提供更准确、快速的检验结果，具有显著的临床应用价值。在今后的临床工作中，应积极推广化学发光免疫检验技术，以提高乙型肝炎的诊断水平和治疗效果。同时，未来还需要进一步开展大样本、多中心的研究，深入探讨化学发光免疫检验的成本效益和在不同人群中的应用效果，为其在临床的广泛应用提供更全面的依据。

参考文献

[1] 倪勇,陈丹丹,龚美娜,等. 两种化学发光免疫分析系统对血清HBsAg突变株的检测能力比较分析[J]. 现代检验医学杂志,2025,40(3):195-198,220.

[2] 户丹,张宪华. 时间分辨免疫荧光法与化学发光法检测乙型肝炎血清标志物结果的一致性分析[J]. 检验医学与临床,2022,19(4):559-560.

[3] 游小兰. 化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附试验应用于乙型肝炎病毒血清学检验中的有效性评价[J]. 山西医药杂志,2022,51(20):2368-2371.

[4] 王艳萍,夏云,史静. 化学发光免疫分析仪检测乙肝五项的性能评价[J]. 中国医学装备,2021,18(12):32-37.

[5] 张嘉懿,郭文伟,沈永明,等. 光激化学发光法检测儿童乙型肝炎核心抗体最佳临界值探讨[J]. 检验医学,2023,38(3):291-293.

[6] 周碧燕,赵丽萍,陶文富,等. 磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物关键性能指标验证[J]. 检验医学,2020,35(5):476-480.

[7] 安哲,孟昊,董炜,等. 化学发光微粒子免疫分析法检测乙型肝炎病毒血清标志物的模式研究[J]. 中国预防医学杂志,2021,22(2):115-119.

[8] 谭延国,王纪越,张然星,等. 两种国产化学发光系统检测HBsAg和HBeAg的效果分析[J]. 国际检验医学杂志,2022,43(24):3006-3011.

[9] 汪海霞,张舒林,赵莹莹,等. 临床实验室检测乙型肝炎病毒表面抗原的方法学关联及效能分析[J]. 中国免疫学杂志,2025,41(7):1772-1776,1781.

[10] 王建红,谭亭昭,赵顺锋,等. 2017-2020年聊城地区乙型肝炎感染及免疫状况分析[J]. 微生物学免疫学进展,2022,50(1):64-69.

...