血清异常凝血酶原联合甲胎蛋白对肝细胞癌的诊断意义

骆连妹 刘荣炽 刘静文 蔚帅帅 伍金华

广东省江门市中心医院（广东 江门）529000

来源：2024年江门市科技计划项目

项目名称：血清异常凝血酶原联合甲胎蛋白检测对肝细胞癌的诊断意义

项目编号：2024YL01036

【摘要】目的 探讨肝细胞癌（HCC）诊断中血清异常凝血酶原(protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ)联合甲胎蛋白（alpha-fetoprotein,AFP）检测的意义。方法 本次研究对象选自2025年5月-2025年6月江门市中心医院就诊的肝病患者358例作为实验组（包括HCC组189例、肝炎组106例、肝硬化组63例），同期健康体检者200例作为正常对照组。均采集静脉血，提取血清后进行PIVKA-Ⅱ和AFP检测，分析检验结果和诊断效能。结果 HCC组患者血清PIVKA-II和AFP水平显著高于肝炎组、肝硬化组和正常对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。PIVKA-II和AFP诊断HCC的敏感度分别为48.7%、40.0%，特异度分别为95.4%、88.4%；PIVKA-II、AFP均为阳性的诊断敏感度为44.9%，特异度为88.9%。结论 血清PIVKA-Ⅱ对HCC具有很好的辅助诊断价值。与单一AFP检测相比，联合PIVKA-Ⅱ检测可进一步提升HCC诊断敏感性、诊断性能,可作为临床诊断的重要指标。

【关键词】异常凝血酶原；甲胎蛋白；肝细胞癌；诊断

The Diagnostic Significance of Abnormal Serum Prothrombin Combined with Alpha-Fetoprotein for Hepatocellular Carcinoma

Luo Lianmei, Liu Rongchi, Liu Jingwen, Wei Shuaishuai, Wu Jinhua

Guangdong Jiangmen Central Hospital (Jiangmen, Guangdong) 529000

【Abstract】Objective: To explore the significance of combined detection of serum abnormal prothrombin (protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ, PIVKA-Ⅱ) and alpha-fetoprotein (AFP) in the diagnosis of hepatocellular carcinoma (HCC). Methods: This study included 358 patients with liver diseases who visited Jiangmen Central Hospital from May 2025 to June 2025 as the experimental group (including 189 cases of HCC, 106 cases of hepatitis, and 63 cases of liver cirrhosis), and 200 healthy individuals as the normal control group. Venous blood was collected from all subjects, and serum was extracted for PIVKA-Ⅱ and AFP detection. The test results and diagnostic efficacy were analyzed. Results: The serum PIVKA-II and AFP levels of HCC patients were significantly higher than those of the hepatitis group, liver cirrhosis group, and normal control group, and the differences were statistically significant (P < 0.05). The sensitivity of PIVKA-II and AFP for diagnosing HCC was 48.7% and 40.0%, respectively, and the specificity was 95.4% and 88.4%, respectively; the diagnostic sensitivity of both PIVKA-II and AFP being positive was 44.9%, and the specificity was 88.9%. Conclusion: Serum PIVKA-II has a good auxiliary diagnostic value for HCC. Compared with single AFP detection, combined PIVKA-II detection can further improve the diagnostic sensitivity and performance of HCC, and can be used as an important indicator for clinical diagnosis.

[Key words] Abnormal prothrombin; Alpha-fetoprotein; Hepatocellular carcinoma; diagnosis

肝细胞癌（HCC）是一种严重危害人类生命健康的恶性肿瘤，其发生、发展均与酒精性肝病、肝硬化、慢性肝炎病毒感染等有关^[1]。据调查，大部分患者首次确诊时，已经进入中晚期，错过了手术切除等根治性治疗时机，所以五年存活率低于20%^[2]。如果能及早确诊，及时采取针对性、高效的治疗手段，可以达到更好的疗效，改善预后。血清甲胎蛋白（AFP）是临床诊断的经典标志物，30-40%的早期HCC患者AFP不会明显升高，HCC诊断鉴别的准确性不高，故需要与其它指标联合应用^[3]。维生素K缺乏或拮抗剂-II诱导蛋白（PIVKA-II），是凝血酶原的一种异常形式，良性肝脏疾病血清中的浓度不会明显提升，如果是高度怀疑的HCC患者，AFP结果为阴性，可以联合PIVKA-Ⅱ检验，获得更多的诊断依据^[4]。为找到最佳的HCC诊断方法，围绕血清PIVKA-Ⅱ联合AFP检验的效果展开分析研究，报道如下：

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2025年5月-2025年6月在本院就诊的358例肝脏疾病患者和200名健康体检者共同作为研究对象，分别作为实验组和正常对照组。实验组包括：HCC组189例、肝炎组106例、肝硬化组63例，年龄29-88岁，女性67名、男性291名。正常对照组年龄27-77岁，女性94名、男性106名。

1.2 方法

两组研究对象均采集3mL空腹静脉血，离心处理后提取血清待检。使用罗氏Roche Cobas e601电化学发光免疫分析仪以及罗氏公司提供的PIVKA-II和AFP检测试剂盒进行检验。

1.3 观察指标

1.3.1 记录各组血清PIVKA-II和AFP检验结果。

1.3.2 对比血清PIVKA-II、AFP单独检验及联合检验对HCC的诊断效能，计算诊断敏感度、特异度。

1.4 统计学分析

运用R语言软件对检测结果进行统计学分析。因为四组数据均呈现非正态分布，所以采用Kruskal–Wallis H检验（非参数ANOVA）对各组结果进行比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。并绘制ROC曲线，比较PIVKA-II和AFP对HCC的诊断效能。

2 结果

2.1 各组血清PIVKA-II和AFP水平比较：4组间血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平均显著差异(H=54.24、30.11，P均＜0.001)。从表1可见，肝细胞癌组血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平均显著高于肝硬化组、肝炎组和正常对照组,HCC患者的血清PIVKA-II和AFP水平最高，其次是肝硬化、肝炎、正常对照组，除肝炎组与对照组PIVKA-II水平无统计学差异及肝炎组与肝硬化组的AFP水平无统计学差异外，其余各组之间指标水平对比均存在显著差异（P＜0.05）。

表1.各组血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平比较

2.2 对比血清PIVKA-II、AFP单独及联合诊断效能：以正常对照组、肝炎组和肝硬化组为对照，绘制PIVKA-Ⅱ和AFP单项及联合检测诊断HCC的ROC曲线。见图1。单项PIVKA-II和AFP对HCC的诊断效能，结果显示AUC分别为0.685(95% CI=0.629–0.739)和0.621(95% CI=0.564–0.676)，最佳截断值分别为26.64 ng/mL和7.11 ng/mL，敏感性分别为48.7%和40.0%，特异性分别为95.4%和88.4%。结果表明PIVKA-II在HCC诊断中具有较高特异性，但敏感性有限。AFP在HCC诊断中具有较高特异性，但敏感性偏低。AFP+PIVKA-II联合诊断HCC，采用Logistic回归模型将AFP与PIVKA-II进行联合，然后基于预测概率计算ROC。结果显示AUC为0.655(95%CI=0.600–0.712)，联合模型的诊断效能略高于AFP（0.621），但低于PIVKA-II（0.685）。联合模型最佳Cut-off为0.282（概率），对应的敏感性为44.9%，特异性为8.9%，特异性仍然较高，敏感性仍偏低。

图1

3 讨论

HCC在临床中属于发生率、致死率较高的疾病，具有较复杂的发生机制，我国80%左右的患者同时存在乙肝病毒感染，病理过程是从慢性肝炎开始，逐渐发展为肝硬化，若得不到有效治疗，最终会发展为肝癌^[5]。患者在初期阶段无症状或轻微不适，一旦出现明显的腹胀、肝区疼痛等症状已经到了中晚期，错过了最佳治疗时间。所以，需要找到高效的早期诊断方式，才能为改善患者预后创造条件。而血清标志物检验重复性好、操作方便、无创伤，适用于HCC早期筛查与诊断。

AFP是被广泛应用的标志物，在胎儿时期由肝脏合成，出生后快速降低，成年人血清中含量不足20ng/mL^[6]。在发生HCC后，肿瘤细胞去分化，重新激活胎儿时期的相关基因，大量合成、释放AFP，提高其在血清中的含量。但研究发现，20-30%的早期HCC患者血清AFP水平无异常升高；而且肝硬化、慢性肝炎等良性疾病患者，肝细胞在修复过程中，容易出现假性AFP升高现象，从而降低诊断结果的准确性。因此，单独进行AFP检验，对于早期HCC诊断存在局限性，还需要联合其它具有更高特异性、敏感性的标志物。

PIVKA-II属于凝血酶原的异常异构体，来自于肝细胞合成，分子量只有72 kDa^[7]。健康者的肝细胞内，维生素K可以参与到γ-羧化酶（GGCX）活动中，羧化谷氨酸残基，促进成熟凝血酶原生成，提高凝血活性。但是HCC发生后，癌细胞的GGCX活性会明显下降，影响正常的凝血酶原前体羧化，大量未羧化的PIVKA-II生成，并提高其在血清中的含量^[8]。因为肝硬化、慢性肝炎等良性疾病发展过程中，并不会损伤肝细胞，不会明显降低GGCX活性，血清PIVKA-II不会大幅度升高，所以相对于AFP，在HCC诊断中特异性更高。部分HCC患者癌细胞中的AFP合成基因还没有被激活的时候，已经出现了GGCX活性抑制现象，通过血清检验会发现PIVKA-II升高，从而弥补AFP诊断盲区，减少漏诊。

本次研究中发现，HCC患者的血清PIVKA-II和AFP水平最高，明显高于肝硬化、肝炎、正常对照组（P＜0.05）。经过分析，这与HCC病理生理机制关系密切，癌细胞重新激活AFP合成基因、增加PIVKA-II合成，从而导致两项指标水平提高。研究还发现，肝硬化组患者的血清PIVKA-II水平明显高于肝炎组和对照组（P＜0.05），究其原因，肝硬化属于HCC的癌前病变，持续性损伤肝细胞，会少量合成释放PIVKA-II，但是还没有出现恶性转化，所以指标水平升高幅度有限。说明，血清PIVKA-II和AFP不仅可以为HCC诊断提供依据，在良性肝病与HCC鉴别诊断中也发挥较大作用。

本次研究中，HCC诊断中血清PIVKA-II单独检验的敏感度为48.7%、特异度为95.4%，AFP单独检验的敏感度为40.0%、特异度为88.4%；两项指标联合检验的敏感度为44.9%、特异度为88.9%。说明，尽管血清PIVKA-II单独检验可以达到较高的诊断敏感度和特异度，但是两项指标水平升高的生物学机制不同，与血清AFP联合检验可以优势互补，避免单一指标检验中因假性升高造成的误诊，特别适合高危人群进一步诊断。由于良性肝病患者也会在肝细胞再生过程中AFP升高，所以HCC诊断敏感度和特异度偏低。而肝细胞恶性转化会直接影响PIVKA-II合成，具有更高的组织特异性，良性肝病患者不会出现假性升高情况，特别适用于AFP阴性HCC患者进一步确诊中。两项指标联合检验，可以覆盖更多阳性病例，过滤假性信号，提高HCC鉴别与诊断的敏感度、特异度。罗氏检测平台可通过整合PIVKA-II、AFP、患者年龄、性别等多个参数建立数字算法模型GAAD，用于帮助临床更早期发现肝癌患者，其评分随着HCC风险的增加而增加，能有效改善大部分初诊患者已是中晚期的现状，为改善患者预后以及提高总体生存率提供有力支持。在本次研究中，各组基于PIVKA-II、AFP、患者年龄、性别等多个参数建立数字算法模型GAAD值分别是：正常对照组（0.38±0.44）、肝炎组（0.86±1.38）、肝硬化组（1.72±2.25）、肝细胞癌组（4.29±3.94）,提示各组患肝细胞癌风险逐步增高。因此，对于慢性肝炎、肝硬化等高危患者，有必要定期展开血清PIVKA-II和AFP联合检测，得出数字算法模型GAAD值，根据GAAD值风险程度尽早进行影像学检查，以便尽早筛查出HCC，尽早采取根治性治疗方案，避免错过最佳治疗时间，提高患者五年存活率。

综上所述，血清PIVKA-Ⅱ作为筛查原发性HCC的血清标志物，其诊断的灵敏度和特异度都高于AFP，而两项标志物联合检测可以同时提高诊断敏感性和特异性，对单一标志物阴性引起的漏诊有着很好的补充作用，也能更好地对HCC患者作出早期诊断，提高手术成功率，降低HCC复发和转移率，改善患者预后。

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