α-珠蛋白基因缺失型、α2珠蛋白基因突变检测联合血红蛋白电泳在儿童α-地中海贫血精准分型及输血治疗中的价值研究

丁赟¹ 李远辉²

1. 会昌县人民医院儿科 江西会昌 342600
   
2. 会昌县人民医院检验科 江西会昌 342600
   

【摘要】目的 评价α-珠蛋白基因缺失型与α2珠蛋白基因突变检测联合血红蛋白电泳在儿童α-地中海贫血（α-地贫）精准分型及输血治疗中的临床价值。方法 选取2025年1月至2026年3月本院收治的α-地贫患儿60例，均行血常规、高效液相色谱法血红蛋白电泳，并采用Gap-PCR检测α-珠蛋白基因缺失型、PCR-反向点杂交检测α2珠蛋白基因突变，疑难病例以Sanger测序验证。分析基因变异与电泳图谱特征的关联，建立多维度精准分型标准；根据分型结果制定个体化输血方案，随访3个月，动态评估输血效果及并发症发生情况。结果 60例：静止型17例、标准型27例、中间型15例、重型1例。联合检测符合率100%，高于单一电泳（86.7%）和单一基因检测（91.7%）（P<0.05）。中间型14例（93.3%）见HbH带，提示基因变异与电泳特征相关。10例输血依赖者个体化输血后，3个月内输血次数、不良反应及血清铁蛋白增速均低于调整前（P<0.05）。结论 联合检测有助于实现儿童α-地贫精准分型，为制定个体化输血方案、降低并发症风险及改善患者预后提供依据。

【关键词】 α-地中海贫血；α-珠蛋白基因缺失；α2珠蛋白基因突变；血红蛋白电泳；精准分型；输血治疗

α-地中海贫血（α-地贫）系α-珠蛋白基因缺失或突变引起α-珠蛋白链合成不足的遗传性溶血性贫血，在我国南方地区分布广泛，人群携带率较高，是威胁儿童健康的重大出生缺陷之一^[1]。该病基因型多样，临床表型差异显著，涵盖静止型、标准型（轻型）、中间型及重型，各型贫血程度、输血需求与预后迥异，因此精准分型对制定合理输血方案至关重要^[2]。现有单一检测方法各有不足：血常规与血红蛋白电泳难以鉴别静止型和标准型，且易漏诊复合突变，且常规基因检测对罕见及新发突变位点覆盖有限，难以揭示基因变异与电泳图谱的关联^[3]。血红蛋白电泳能直观展示血红蛋白组分的量变，而基因缺失与突变联合检测可从分子层面明确病因，两者互补，有助于分析基因变异与电泳特征的关联，建立多维度精准分型标准^[4]。据此，本研究联合检测α-珠蛋白基因缺失型、α2珠蛋白基因突变及血红蛋白电泳，构建儿童α-地贫精准分型体系，并依据分型制定个体化输血策略，通过随访评估输血效果及并发症，现报道如下。

1 资料与方法

• 1. 
     一般资料
     

60例α-地贫患儿于2025年1月至2026年3月本院收治，其中男34例、女26例，年龄1~14岁，平均（6.8±3.4）岁。纳入标准：①符合α-地贫诊断；②年龄≤14岁；③病历及检测资料齐全；④监护人知情同意准。排除标准：①合并缺铁性贫血等其他贫血；②合并血液肿瘤或急性感染；③近3个月参与其他干预性研究；④随访资料不全。伦理委员会已批。

• 1. 
     检测方法与精准分型标准
     

（1）血常规：以全自动血细胞分析仪检测RBC、Hb、MCV、MCH。

（2）血红蛋白电泳：应用HPLC测定HbA2、HbF、HbH、Hb Bart’s等组分，记录各组分占比及异常峰型。

（3）基因检测：以Gap-PCR及反向点杂交鉴定α-珠蛋白基因缺失型（–SEA、-α3.7、-α4.2）与α2突变类型（αCSα、αQSα、αWSα等非缺失型）；电泳与常规基因结果不符或疑为罕见突变者，行Sanger测序验证。

（4）精准分型标准：静止型为1个α基因受累（如-α/αα）；标准型为2个α基因受累（如–/αα、-α/-α）；中间型（HbH病）为3个α基因受累（如–/-α及合并α2突变）；重型为4个α基因受累（–/–）。综合基因型、血液学指标及电泳图谱特征，建立多维精准分型标准。以联合检测综合结果为参照，比较单一电泳、单一基因检测与联合检测的分型符合情况。

1.3 输血治疗方案与疗效判定

中间型患儿根据精准分型选择输血方案：若Hb持续低于70 g/L且伴生长发育迟缓、脾功能亢进明显，则予高量输血，使Hb维持在90~100 g/L；若处于溶血间歇期且生长发育基本正常，则行间歇性低量输血。随访3个月，记录输血后48~72 h Hb升高幅度、Hb维持时间、3个月内输血次数及输血相关不良反应（发热、过敏、溶血反应等），并动态评估输血效果与并发症；同步监测血清铁蛋白（SF）及其增长速率。输血依赖判定为3个月内输血≥3次且输血间隔≤28 d。

• 1. 
     观察指标
     

①血液学与电泳参数：各分型患儿MCV、MCH、Hb、HbA2水平及HbH带检出率；②分型效能：单一检测与联合检测的分型符合率；③关联性分析：基因变异与电泳图谱特征的关系；④输血疗效与安全性：个体化方案实施前后3个月内输血频次、不良反应及SF增长速率的变化。

1.5 统计学方法

SPSS 26.0处理数据。计量资料（±s）行t检验或方差分析，计数资料[n（%）]行χ²检验或Fisher确切概率法；Kappa检验方法一致性，Pearson分析基因变异与电泳特征关联。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料及临床分型

60例分型：静止型17例（28.3%）、标准型27例（45.0%）、中间型15例（25.0%）、重型1例（1.7%）。基因型：单纯缺失型48例（80.0%），以–SEA/αα（23例）、-α3.7/αα（15例）为主；缺失合并α2突变型10例（16.7%），含–SEA/αCSα 4例、–SEA/αQSα 3例、-α3.7/αQSα 3例；单纯非缺失突变型2例（3.3%）。

2.2 不同分型患儿血液学及电泳参数比较

MCV、MCH随α基因受累数增加而降低；中间型HbH带阳性14例（93.3%），重型Hb Bart’s带1例；标准型HbA2高于静止型（P<0.05），见表1。

表1 不同分型患儿血液学及电泳参数比较（±s）

指标	静止型（n=17）	标准型（n=27）	中间型（n=15）	F值	P值
Hb（g/L）	118.6±9.2	96.4±10.8	71.5±11.3	92.41	<0.001
MCV（fl）	78.4±6.1	68.9±6.8	61.2±7.4	38.72	<0.001
MCH（pg）	25.3±2.2	21.6±2.5	18.4±2.7	41.28	<0.001
HbA2（%）	2.5±0.3	2.9±0.4	2.2±0.5	17.63	<0.001
HbH带[n（%）]	0（0）	0（0）	14（93.3）	—	<0.001

2.3 单一与联合检测结果比较

联合检测符合率100%，高于单一电泳86.7%和单一基因检测91.7%（χ²=8.48，P=0.014）；电泳漏诊静止型及-α/-α，基因漏检罕见α2突变，见表2。

表2 单一与联合检测结果比较（例）

检测方法	符合	不符合	符合率（%）	Kappa值
单一血红蛋白电泳	52	8	86.7	0.71
单一基因检测	55	5	91.7	0.83
联合检测	60	0	100.0	1.00

2.4 基因变异与电泳特征关系分析

α基因受累数与HbH带含量呈正相关（r=0.78，P<0.001），与HbA2含量呈负相关（r=-0.42，P=0.001）。复合突变型（如–SEA/αCSα、–SEA/αQSα）中间型患儿的HbH带含量高于单纯缺失型[（28.4±6.2）% vs（19.6±5.1）%，t=3.87，P=0.002]。

2.5 个体化输血前后疗效及并发症比较

5例中间型中10例输血依赖，经精准分型个体化输血并随访3个月：输血次数由（4.1±0.9）次降至（3.0±0.7）次（t=4.32，P=0.002）；不良反应由5例次减至1例次；SF增速由（45.2±12.6）μg/L/月降至（28.7±9.4）μg/L/月（t=3.32，P=0.008）；Hb升幅及维持时间前后无差异（P>0.05）。

3讨论

本研究发现，联合α-珠蛋白基因缺失型、α2突变检测与血红蛋白电泳，可使儿童α-地贫分型总符合率达100%，明显优于单一电泳或单一基因检测。血液学指标在鉴别α-地贫基因型时存在重叠，仅凭MCV、MCH或HbA2难以准确区分静止型与标准型，尤其对-α/-α与–/αα的鉴别符合率有限^[5]。不同区域基因型谱各异，南方以–SEA、-α3.7缺失为主，但α2突变在部分地区检出率不可忽视，常规三项缺失检测难以覆盖全部突变^[6]。各地筛查实践表明，结合本地基因型谱开展联合筛查与分型，是提高诊断准确性的可行途径^[7]。本组60例中，缺失合并α2突变占16.7%，若仅行常规基因筛查，可能被误判为单纯标准型，从而低估其进展为HbH病的风险。联合检测以基因结果为定性基础、电泳峰型为定量补充，二者互证，显著降低单一方法的误诊与漏诊。

基因变异与电泳图谱的关联分析为本研究核心发现之一。中间型患儿中，–SEA/αCSα、–SEA/αQSα等复合基因型者Hb水平更低、HbH带含量更高，与既往HbH病大样本研究关于“非缺失型突变合并缺失型者表型重于单纯双缺失型”的结论一致^[8]。α-珠蛋白基因型并非表型的唯一决定因素，α基因拷贝数、β-珠蛋白基因型及HBS1L-MYB等遗传修饰共同影响残余α链合成与γ-珠蛋白代偿^[9]。据此，本研究整合基因型、血液学指标与电泳图谱，建立多维度精准分型标准，实现由单一“基因标签”向“基因-蛋白-表型”综合判定的转变，为个体化输血提供分型依据。

就输血治疗而言，精准分型的意义在于将经验性输血转为量化目标管理。现行指南建议输血依赖型地贫维持输血前Hb 90~105 g/L，以保障生长发育并抑制无效红细胞生成^[10]。本研究中，中间型患儿接受个体化方案后，3个月输血次数及SF增速均下降，而输血后Hb升幅与维持时间未见受影响，提示输血次数减少主要源于对间歇期患儿的“减法”优化，而非疗效妥协。规范的抗体筛查与输血前评估可进一步降低同种免疫及不良反应风险^[11]。遗传性难治性溶血性贫血患儿的回顾性研究也提示，按表型分层调整输注策略可在保证疗效的同时减轻输注负担^[12]。随访中不良反应例次减少，亦支持精准分型指导的个体化输血有助于降低并发症风险。

从临床应用看，血红蛋白电泳的价值在于将基因型“翻译”为可动态监测的蛋白表型。HbA2与HbF联合检测已被证实可提高地贫携带者筛查效能^[13]；但HbA2对静止型与标准型α-地贫的区分能力有限，其截断值需结合本地区人群特征验证^[14]。HbH带是否检出及其含量可作为α基因受累数的半定量指标，与基因检测形成闭环验证，本研究中α基因受累数与HbH带含量的正相关即为佐证。基于联合检测与电泳动态监测的“检测-分型-治疗-随访”一体化流程，有助于及时调整输血阈值与间隔。我国地贫疾病负担沉重，建立规范化筛查与精准诊疗体系对降低患儿致残率、减轻家庭和社会负担意义重大^[15]。本研究流程方法成熟、成本可控，便于县级医院推广。

综上，联合α-珠蛋白基因缺失型、α2突变检测与血红蛋白电泳，可显著提升儿童α-地贫精准分型水平，阐明基因变异与电泳图谱的关联；据此制定的个体化输血方案可减少输血次数、降低并发症风险，为改善预后和生存质量提供理论与实践依据。但本研究为观察性设计，单中心、且样本量有限，重型患儿仅1例，随访仅3个月，且疗效评价主要依赖Hb水平与输注频次；后续应开展大样本、长随访、多中心研究，结合生长发育指标、生活质量及器官铁沉积评估进一步验证，并探索联合检测在产前诊断与遗传咨询中的应用价值。

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基金资助：赣州市指导性科技计划项目（编号：2025ZSFCE0538）

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